转接香菇菌种时，如何判断工具已经灭菌完全？

在转接香菇菌种过程中，判断接种工具是否灭菌完全可以通过以下几种方式：

1. 观察颜色变化：如果是使用金属接种工具（如接种针、接种铲、镊子等）通过酒精火焰灼烧灭菌，当工具在火焰上灼烧至呈现红热状态时，一般可以认为达到灭菌要求。红热状态表示工具的温度达到了足以杀灭微生物的程度。

2. 灼烧时间：对于使用酒精火焰灼烧灭菌的工具，持续在火焰外焰处灼烧 10 - 15秒左右，通常能达到灭菌效果。不过，具体的灼烧时间还需根据火焰大小和工具大小等因素适当调整。

3. 无菌检测：如果条件允许，可以在灭菌后的接种工具接触无菌的营养琼脂培养基，然后将培养基置于适宜的条件下培养一段时间（如2 - 3天），观察培养基上有无微生物生长。如果没有微生物生长，说明接种工具灭菌完全；如果有微生物生长，说明灭菌不彻底。

需要注意的是，接种工具在灭菌后应放置在无菌区域内，避免在未使用前接触到有菌的物体，以保持其无菌状态。