转接香菇菌种时如何避免杂菌污染?
在转接香菇菌种时,要避免杂菌污染,可以参考以下方法:
1. 环境消毒:
(1)在接种前,使用紫外线灯对接种室、超净工作台照射 20 - 30分钟;同时使用化学药剂如福尔马林、气雾消毒剂等进行熏蒸消毒,确保接种空间无菌。
(2)定期对接种室墙壁、地面、设备表面等进行清洁和消毒,防止杂菌积累。
2. 工具灭菌:
(1)接种工具如接种针、接种铲、镊子等,使用前要在高温灭菌器(如手提式高压灭菌锅)中进行灭菌,一般在 121 - 126℃下灭菌 20 - 30分钟。
(2)也可以通过酒精灯火焰灼烧的方式进行灭菌,在操作过程中,要定期对接种工具进行灼烧灭菌,防止工具带菌。
3. 菌种处理:
(1)菌种瓶(袋)的外壁用 75%酒精擦拭消毒,减少表面杂菌。
(2)打开菌种瓶(袋)时,尽量使开口靠近酒精灯火焰或在无菌区内,防止空气中的杂菌落入。
4. 规范操作:
(1)操作过程中,动作要迅速、准确,尽量减少菌种暴露在空气中的时间,降低杂菌污染的机会。
(2)接种工具在接触菌种和培养基时,应保持无菌状态,避免触碰非无菌物品。
5. 人员要求:
(1)操作人员应经过专业培训,熟练掌握接种技术和无菌操作规范。
(2)操作时,操作人员应保持手部清洁,避免用手触摸头发、面部等部位。
6. 培养料灭菌:
(1)用于转接的新培养基(培养料)要进行彻底灭菌,确保无杂菌残留。
(2)灭菌后的培养基应保存在无菌环境中,防止二次污染。
7. 气流控制:
(1)在接种室、超净工作台内保持适当的气流方向和速度,使空气经过过滤装置进入操作区,避免外界带菌空气进入。
(2)操作过程中,尽量避免产生过大的气流扰动,防止将环境中的杂菌吹入接种区域。